Matériel et objectif de l'expérience PCR

L'expérience de PCR principe et application nécessite un équipement spécifique, notamment un thermocycleur PCR. Le matériel comprend des tubes d'échantillons d'ADN, des amorces, des nucléotides, de l'ADN polymérase, des micropipettes, et des consommables stériles.

Highlight: L'objectif de l'expérience est d'amplifier un fragment d'ADN pour le rendre identifiable lors de l'électrophorèse.

Le processus débute par la transformation de l'ARN viral en ADN, car le génome du SARS-CoV-2 est composé d'ARN.

Vocabulary: ARN signifie Acide RiboNucléique, tandis qu'ADN signifie Acide DésoxyriboNucléique.

La procédure implique plusieurs étapes de prélèvement et de mélange de solutions, suivies par le placement de l'échantillon dans le thermocycleur pour 12 cycles de réplication PCR.

Definition: La PCR, ou Polymerase Chain Reaction, est une technique qui permet d'obtenir un million de copies d'ADN en moins d'une heure à partir de très faibles quantités d'échantillon.

Le processus PCR comprend trois phases principales : la dénaturation (séparation des brins d'ADN), l'hybridation (fixation des amorces), et l'élongation (synthèse des brins complémentaires). Ces étapes sont répétées lors de chaque cycle, amplifiant exponentiellement l'ADN cible.

Example: Un cycle PCR typique dure environ une minute et comprend le chauffage de l'échantillon à 95°C pour la dénaturation, suivi de l'hybridation et de la polymérisation.

La visualisation des résultats se fait par électrophorèse sur gel d'agarose, une technique permettant de séparer les fragments d'ADN selon leur taille sous l'influence d'un champ électrique.