Principe de la spectrophotométrie

La spectrophotométrie est une technique d'analyse basée sur l'absorption de la lumière par les molécules en solution. Lorsqu'un faisceau de lumière blanche traverse une solution colorée, certaines longueurs d'onde sont absorbées tandis que d'autres sont transmises. Ce phénomène permet de mesurer l'absorbance de la solution.

Définition: L'absorbance est une grandeur sans unité qui quantifie la capacité d'une solution à absorber la lumière à une longueur d'onde donnée.

Le spectrophotomètre est l'instrument utilisé pour mesurer l'absorbance. Il est composé des éléments suivants :

• Une source de lumière blanche
• Un monochromateur pour sélectionner une longueur d'onde spécifique
• Une cuve contenant l'échantillon à analyser
• Un capteur de lumière
• Un système d'affichage

Highlight: Le choix de la longueur d'onde pour mesurer l'absorbance est crucial et dépend de la nature de l'espèce chimique étudiée.

La loi de Beer-Lambert établit une relation entre l'absorbance mesurée et la concentration de l'espèce absorbante en solution. Elle s'exprime par la formule :

A = ε(λ).l.c

Où :

• A est l'absorbance (sans unité)
• ε(λ) est le coefficient d'extinction molaire en L/mol/cm (dépendant de la longueur d'onde)
• l est l'épaisseur de solution traversée en cm
• c est la concentration molaire en mol/L

Vocabulaire: Le coefficient d'extinction molaire est une constante caractéristique de chaque espèce chimique à une longueur d'onde donnée.