Dosage spectrophotométrique
Le dosage spectrophotométrique consiste à mesurer l'absorbance de solutions colorées à une longueur d'onde spécifique. Pour déterminer une concentration inconnue, on établit d'abord une courbe d'étalonnage A = f(c) à partir de solutions de concentrations connues.
Les solutions colorées absorbent dans le domaine visible, tandis que les solutions incolores contenant des molécules à double liaison absorbent dans l'ultraviolet. Plus une solution est colorée, plus son absorbance Aλ est élevée car l'intensité lumineuse Iλ qui la traverse diminue.
La loi de Beer-Lambert établit que l'absorbance est directement proportionnelle à la concentration molaire, à l'épaisseur traversée et au coefficient d'extinction molaire : Aλ = ελ·l·c. Dans des conditions expérimentales fixées (même longueur d'onde, même cuve), on peut simplifier cette relation à Aλ = k·c, où k est le coefficient de proportionnalité.
💡 À retenir : L'absorbance maximale d'une solution colorée correspond exactement aux radiations manquantes sur son spectre - c'est ce qui détermine la couleur que nous percevons !