Ce chapitre introduit les concepts fondamentaux de la spectrophotométrie et explique la loi de Beer-Lambert, essentielle pour calculer l'absorbance d'une solution.
L'absorbance est définie comme une grandeur physique qui traduit la capacité d'un milieu à absorber un rayonnement lumineux. Elle dépend de trois facteurs principaux :
- La concentration C de la solution
- La longueur d'onde λ de la lumière
- L'épaisseur l de la solution traversée
Pour effectuer des mesures précises, on choisit généralement la longueur d'onde λmax correspondant au maximum d'absorbance Amax.
La loi de Beer-Lambert est l'équation fondamentale utilisée pour calculer l'absorbance :
A = ε.l.c
Où :
- A est l'absorbance de la solution (sans unité)
- ε est le coefficient d'extinction molaire (en L/mol/cm)
- l est l'épaisseur de la solution traversée par la lumière (en cm)
- c est la concentration de la solution (en mol/L)
Highlight: La loi de Beer-Lambert établit une relation linéaire entre l'absorbance et la concentration, ce qui en fait un outil puissant pour l'analyse quantitative.
Vocabulary: Le coefficient d'extinction molaire (ε) est une constante caractéristique de chaque substance, qui dépend de la longueur d'onde.
Une propriété importante de la loi de Beer-Lambert est son additivité. Dans un mélange contenant plusieurs espèces chimiques, l'absorbance totale est la somme des absorbances individuelles :
A = A₁ + A₂ + A₃ + ...
Example: Dans une solution contenant deux colorants, l'absorbance totale sera la somme des absorbances de chaque colorant.
Il est crucial de noter que la loi de Beer-Lambert a des limites d'application :
- L'absorbance A doit être inférieure à 2 pour maintenir la linéarité.
- La concentration de la solution doit être inférieure à 10⁻² mol/L pour éviter les déviations dues aux interactions moléculaires.
Definition: La transmittance est une autre grandeur liée à l'absorbance. Elle représente la fraction de lumière transmise à travers l'échantillon.
En pratique, pour calculer l'absorbance avec la longueur d'onde, on utilise un spectrophotomètre qui mesure directement l'absorbance à différentes longueurs d'onde. Le choix de la longueur d'onde pour mesurer l'absorbance est crucial et dépend des propriétés d'absorption de la substance étudiée.
Quote: "À faire les calculs, on choisit la longueur d'onde λmax correspondant au maximum d'absorbance Amax."
Cette approche permet d'obtenir la sensibilité maximale pour les mesures d'absorbance et de concentration.
